Adenovirus Hızlı Test-Burun Salgısı
SARS-CoV-2 Nükleik Asit Test kiti, nazofaringeal sürüntülerde, orofaringeal sürüntülerde ve balgamda COVID-19 nükleik asidinin kalitatif tespiti için geçerlidir. Test sonuçları, enfeksiyon veya şüpheli hastalar için moleküler tanı temeli sağlar ve klinik tanı için tek kriter olarak kullanılmamalıdır.
Açıklama
Kullanım amacı:
SARS-CoV-2 Nükleik Asit Test kiti, nazofaringeal sürüntülerde, orofaringeal sürüntülerde ve balgamda COVID-19 nükleik asidinin kalitatif tespiti için geçerlidir. Test sonuçları, enfeksiyon veya şüpheli hastalar için moleküler tanı temeli sağlar ve klinik tanı için tek kriter olarak kullanılmamalıdır.
Malzemeler:
Malzemeler | Özellikler | kapak rengi | Kompozisyon |
COVID-19 Reaksiyon Karışımı | 1165µL × 1 tüp | Kahverengi | Tampon, dNTP'ler, Primerler, Problar. |
COVID-19Enzim Karışımı | 85µL × 1 tüp | Mavi | Taq DNA polimeraz, Ters Transkriptaz, UDG |
Pozitif kontrol | 200 µL × 1 tüp | Sarı | Hedef gen ve IC'nin psödovirüsü |
Negatif kontrol | 200µL×1tüp | Renksiz | ddH2O |
Test prosedürü:
A. Numune Hazırlama
Çıkarılan RNA, SARS-CoV-2 Nükleik Asit Test kiti için başlangıç materyalidir.
Önemli: Her nükleik asit ekstraksiyon prosedürü, bir Pozitif kontrol (40 μL, steril salin solüsyonlarıyla/istenen hacme PBS ile seyreltin) ve bir Negatif kontrol (40 μL, steril salin solüsyonlarıyla/istenen hacme PBS ile seyreltin) ile eşzamanlı olarak gerçekleştirilmelidir.
Aşağıdaki ticari nükleik asit ekstraksiyon kitlerinin kullanılması tavsiye edilir: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Viral RNA Mini kiti (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA Kiti (TIANGEN);
B. Reaksiyon Karışımı kurulumu
1. Tüm reaktifler ve numuneler kullanımdan önce tamamen çözülmeli, tamamen karıştırılmalı ve oda sıcaklığında (yaklaşık 18 ila 25 derece) kısa süre santrifüjlenmelidir.
2. Uygun boyutta bir polipropilen mikrosantrifüj tüpünde Reaksiyon Karışımının gerekli hacmini hazırlayın.
3. Uygun bir optik 96-kuyulu reaksiyon plakasının veya uygun bir optik reaksiyon tüpünün gerekli her kuyucuğuna 25 µL Reaksiyon Karışımı pipetleyin.
C. Şablon ekleme
1. Örnekler/Pozitif kontrol/Negatif kontrolden 5 μL ekstrakte edilmiş RNA ekleyin. Toplam hacim 30 μL'dir.
Reaksiyon Kurulumu | |
COVID-19 Reaksiyon Karışımı | 23.3µL |
COVID-19Enzim Karışımı | 1.7 µL |
Örnekler veya Kontroller | 5 µL |
Toplam ses | 30µL |
2. Numuneleri ve kontrolleri yukarı ve aşağı pipetleme/Vorteks yaparak Reaksiyon Karışımı ile iyice karıştırın.
3. 96-kuyulu reaksiyon plakasını uygun kapaklarla veya optik yapışkan filmle ve reaksiyon tüplerini uygun kapaklarla kapatın.
4. 96-kuyulu reaksiyon plakasını bir mikrotitre plaka rotorlu bir santrifüjde yaklaşık 2500 rpm'de 30 saniye santrifüjleyin.
D. Real-Time PCR Enstrümanını Programlama
Farklı gerçek zamanlı PCR cihazlarının kurulumu ve programlanması ile ilgili temel bilgiler için lütfen ilgili cihazın kullanım kılavuzuna bakın. Test, ABI7500 Real-Time PCR sistemi için optimize edilmiştir. PCR çalışması, aşağıdaki tabloda açıklandığı gibi döngü koşullarıyla gerçekleştirilir.
Numara. | Sahne | Sıcaklık | Süre | döngüler | Veri toplama |
1 | Ters transkripsiyon reaksiyonu | 50 derece | 10 dk | 1 | / |
2 | ön denatürasyon | 95 derece | 30 saniye | 1 | / |
3 | doğallık | 95 derece | 10 saniye | 45 | / |
Tavlama ve uzatma | 58 derece | 30 saniye | Uç nokta floresan koleksiyonu |
Floresan dedektörlerini tanımlayın
Hedef | Dedektör Adı | muhabir | söndürücü |
COVID-19'e özgü RNA | Hedef ORF1ab geni | dostum | Hiçbiri |
Hedef N geni | HEX/VIC | Hiçbiri | |
Hedef E geni | ROX | Hiçbiri | |
Dahili kontrol | kahya geni | Cy5 | Hiçbiri |
*Lütfen cihazın floresan dahili referansını "Yok" olarak ayarlayın, örneğin: ABI serisi cihazlar için "Pasif Referans"ı "Yok" olarak ayarlayın.
E. Veri analizi
Lütfen analiz parametrelerini ayarlayın ve verileri ilgili cihazların çalıştırma talimatlarına göre analiz edin.
ABI 7500'ü örnek alın:
Taban Çizgisi, amplifikasyonun erken döngülerinde bulunan arka plan floresansını ortadan kaldıran, ancak amplifikasyon sinyallerinin arka planın üzerine çıktığı alanla örtüşmeyen bir aralığa ayarlanmalıdır (Başlangıç değeri:3~10; Bitiş değeri: {{2} }). Döngü Eşiği (Ct), üstel fazın tabanında olmalıdır. Analiz sonucunu otomatik olarak elde etmek için "Analiz"e tıklayın ve "Rapor" penceresinde tespit sonucunu okuyun.
Popüler Etiketler: adenovirüs hızlı test - burun salgı, Çin, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toplu
Soruşturma göndermek
Bunları da sevebilirsiniz









